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教你如何解決這些關(guān)于小鼠elisa檢測試劑盒的常見問題

發(fā)布時(shí)間:2021-08-23   點(diǎn)擊次數(shù):1428次
  小鼠elisa檢測試劑盒是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。
 
  實(shí)驗(yàn)原理:                                     
  將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。
 
  性能:
  1、特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
  2、重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
  3、靈敏度:最小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
 
  小鼠elisa檢測試劑盒的常見問題解析:
  1、加樣量不一致?
  解決方法:樣品稀釋前應(yīng)充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。
  2、樣品數(shù)量多少不一,加樣時(shí)間有長有短?
  解決方法:重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與第1次接近。
  3、保溫時(shí)間不一致,洗滌條件不一致,操作人員不一致?
  解決方法:重復(fù)測定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性。
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